液相色譜儀進樣方式

液相色譜儀的進樣裝置要求密封性好，死體積小，重復性好，保證中心進樣，進樣時對色譜系統的壓力和流量影響小。HPLC進樣方式有隔膜進樣、停流進樣、閥進樣和自動進樣器進樣等。

一、隔膜進樣：

        用微量注射器將樣品注入專門設計的與HPLC色譜柱相連的進樣頭內，可把樣品直接送到色譜柱填充床的中心，死體積幾乎等于零，可獲得*柱效，且價格便宜，操作方便。但不能在高壓下使用（如10MPa以上）；隔膜容易吸附樣品產生記憶效應，使進樣重復性只能達到1%～2%；能耐各種溶劑的橡皮不易找到，常規分析使用受到限制。

二、停流進樣：

        可避免在高壓下進樣。但在HPLC中由于隔膜的污染，停泵或重新啟動時往往會出現鬼峰；保留時間不準。在以峰的始末信號控制餾分收集的制備色譜中，效果較好。

三、閥進樣：

        HPLC分析常用六通閥，其關鍵部件由圓形密封墊（轉子）和固定底座（定子）組成。由于閥接頭和連接管死體積的存在，柱效低于隔膜進樣（約下降5%～10%），但耐高壓（35～40MPa），進樣量準確，重復性好（0.5%），操作方便。

  1、六通閥進樣方式：

（1）部分裝液法進樣：

        進樣時，進樣量應不大于定量環體積的50%（zui多75%），要求每次進樣體積準確、相同。

        此法進樣的準確度和重復性決定于注射器取樣的熟練程度，而且易產生由進樣引起的峰展寬。

（2）*裝液法進樣：

        進樣時，進樣量應不小于定量環體積的5～10 倍（zui少3倍），這樣才能*置換定量環內的流動相，消除管壁效應，確保進樣的準確度和重復性。

  2、六通閥使用和維護注意事項：

（1）樣品溶液進樣前必須用0.45μm濾膜過濾，以減少微粒對進樣閥的磨損。

（2）轉動閥芯時不能太慢，更不能停留在中間位置。否則流動相受阻，使泵內壓力劇增，甚至超過泵的zui大壓力，再轉到進樣位時，過高的壓力將使色譜柱損壞。

（3）為防止緩沖鹽和樣品殘留在進樣閥中，每次分析結束后應沖洗進樣閥。通常可用水沖洗，或先用能溶解樣品的溶劑沖洗，再用水沖洗。

四、自動進樣器進樣：

        用于大量樣品的常規分析。